Omega-hydroksylaza leukotrienowa B4 w ludzkich leukocytach wielojądrzastych. Częściowe oczyszczenie i identyfikacja jako cytochromu P-450.

Ludzkie leukocyty polimorfojądrowe (PMN) nie tylko syntetyzują i odpowiadają na leukotrien B4 (LTB4), ale także szybko katabolizują mediatora stanu zapalnego, a zwłaszcza przez omega-utlenianie. Aby scharakteryzować enzym (y) odpowiedzialny (e) za omega-utlenianie LTB4, ludzki PMN został rozbity przez sonikację i poddany wirowaniu różnicowemu, aby uzyskać frakcje błonowe, granulkowe i cytozolowe (zidentyfikowane za pomocą markerów biochemicznych). Aktywność omega-hydroksylazy LTB4 została zatężona (łącznie z aktywnością reduktazy cytochromu NADPH) tylko w frakcji błonowej (aktywność właściwa wzrosła 10-krotnie w porównaniu z całymi sonikatami, 41% odzysku). Nieznaczną aktywność wykrywano w granulkach lub frakcjach cytozolu. Aktywność omega-hydroksylazy LTB4 w izolowanych błonach PMN była liniowa względem czasu trwania inkubacji i stężenia białka, była maksymalna przy pH 7,4, miała Km dla LTB4 0,6 mikroM i była zależna od tlenu i na zredukowanych nukleotydach pirydynowych (pozorna Km dla NADPH = 0,5 mikroM, pozorny Km dla NADH = 223 microM). Omegahydroksylaza LTB4 została znacząco zahamowana przez tlenek węgla, żelazicytochrom c, SKF-525A i Triton X-100, ale nie uległa zmianie pod wpływem alfa-naftoflawonu, azydku, cyjanku, katalazy i dysmutazy ponadtlenkowej. Na koniec, izolowane membrany PMN wykazywały widmo różnicowe tlenku węgla z pikiem przy 452 nm. Tak więc, częściowo oczyściliśmy omega-hydroksylazę LTB4 w ludzkim PMN i zidentyfikowaliśmy enzym jako związany z błoną, zależny od NADPH cytochrom P-450.
[więcej w: schizofrenia paranoidalna opis przypadku, stopa plasko koslawa, setaloft skutki uboczne ]