Nieenzymatyczne indukowane glikozylacją modyfikacje nietkniętej rurkowej błony podstawnej z bydła.

Zbadaliśmy zmiany strukturalne w rurkowej błonie podstawnej nerkowej bydła (TBM) po nieenzymatycznej glikozylacji in vitro (NEG). Izolowany TBM inkubowano przez 2 tygodnie w 37 ° C pod nieobecność cukru lub w obecności glukozy lub rybitolu w warunkach, które minimalizowały degradację i uszkodzenia oksydacyjne. Tworzenie NEG i sieciowania w glikowanej TBM potwierdzono przez zmniejszoną rozpuszczalność, zwiększone ilości materiału o niskiej ruchliwości przez SDS-PAGE i zwiększoną specyficzną fluorescencję w porównaniu do kontroli. Analiza morfologiczna za pomocą skaningowej mikroskopii elektronowej o wysokiej rozdzielczości i niskim napięciu (LV-SEM) ujawniła złożoną trójwymiarową siatkę wzajemnie połączonych pasm z otworami pośrednimi. Glikolowany TBM ulegał wyraźnym zmianom morfologicznym, w tym 58% wzrostowi powierzchni obrazu zajmowanej przez otwory. Było to spowodowane widocznym wzrostem liczby dużych otworów (średnice> 12,5 nm), podczas gdy liczba małych otworów (średnica <12,5 nm) pozostała niezmieniona. Odkrycia te potwierdzają wcześniejsze badania fizjologiczne, w których stwierdzono, że utrata permerelektywności kłębuszkowej obserwowana u pacjentów z nefropatią cukrzycową wynika z powstawania dużych porów w barierze filtracyjnej nerki, której BM jest głównym składnikiem. Wnioskujemy, że NEG i tworzenie wiązań krzyżowych między składnikami BM prowadzi do modyfikacji ultrastruktury BM, która może odgrywać rolę w utracie funkcji bariery w cukrzycowej mikroangiopatii i nefropatii. [podobne: sprawdzian układ pokarmowy puls życia 2, stenoza szyjna, stenty powikłania ]